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Avidity Avitag™ 用酶對Avitag 進行體外生物素化

更新時間:2021-06-28      點擊次數:3036

 

Avidity Avitag™ 技術

Avidity 開發和銷售用于連接分子的分子親和工具。我們的 AviTag™ 技術使用來自大腸桿菌的生物素連接酶 (BirA) 在*的 15 個氨基酸肽標簽上采用高度靶向的酶促偶聯單一生物素。AviTag™ 序列是 GLNDIFEAQKIEWHE。面向鏈霉親和素包被的表面,這為分子結合相互作用創造了理想的展示。Avidity 的 AviTag 技術的科學優勢已經引起人們的注意。目前,AviTag 技術被制藥公司使用,并被 30 多個國家的研究人員使用。

Avidity Avitag™ 技術-酶對 Avitag 進行體外生物素化

 

BIOTIN PROTIEN LIGASE
生物素-蛋白連接酶(EC 6.3.4.15)激活的生物素以形成生物素5'腺苷酸并且將生物素與生物素接受性的蛋白質。它還充當生物素操縱子阻遏物。該蛋白質由 birA 基因編碼。

這種酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶。

Avidity 銷售純化生物素連接酶


BirA 500 40ug 生物素連接酶 1 mg/ml

散裝 BirA 300ug 生物素連接酶 3 mg/ml

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Avitag'd 蛋白的體外標記方案: 在細菌提取物中
純化 在哺乳動物提取物中 在細胞表面上 在 MHC 四聚體上

 

BirA500 - BirA500:BirA 生物素-蛋白質連接酶標準反應試劑盒,250.00 美元

 

 

BirA 生物素蛋白連接酶 (EC 6.3.4.15) 激活生物素以形成生物素 5'-腺苷酸,并將生物素轉移到生物素接受蛋白(如 AviTag™ 肽)。它還充當生物素操縱子阻遏物。該蛋白質由 birA 基因編碼。

請注意:我們強烈建議使用 AviTag™ 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反應速率對 AviTag™ 序列進行生物素化,并且與使用的其他肽序列相比,反應速率高出一個數量級或更多。與其他肽生物素化序列相比,AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育時間,從而最大限度地減少與蛋白酶和蛋白質不穩定性相關的輔助問題。

 

 

產品信息

套件隨附以下物品:

  • 兩 (2) 瓶 20uL,每瓶 1mg/mL BirA 生物素-蛋白質連接酶(總共 40ug)
  • 兩 (2) 個小瓶,每瓶 1.5mL BiomixA(0.5M 雙辛緩沖溶液,pH 8.3)
  • 兩 (2) 個小瓶,每瓶 1.5mL BiomixB(100mM ATP、100mM Mg(OAc)2、500uM d-生物素)
  • 兩 (2) 個 1.5mL 小瓶,每個額外的 BIO-200(500uM d-生物素)

BirA 生物素-蛋白質連接酶 (EC 6.3.4.15) 通過 ATP 中間體(生物素 5'-腺苷酸)以高效且有針對性的方式將 d-生物素與生物素受體肽/蛋白質共價添加。酶促生物素化蛋白質的下游應用是多種多樣的、重要的和強大的。生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用經常被用于親和層析或蛋白質固定在表面或底物上。通過抗生物素抗體或親和素/鏈霉親和素-報告酶偶聯物(-HRP、-堿性磷酸酶)或熒光探針進行蛋白質檢測成為可能。生物素化 MHC 分子的多聚體形式是免疫生物學中的常用工具。

當與我們的 AviTag™ 生物素受體肽氨基酸序列結合使用時,生物素化發生的速度是天然大腸桿菌 BCCP 底物的兩倍,與其他肽序列的生物素化相比,其發生率高出一個數量級或更多。因此,與其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育時間來完成生物素化。如果蛋白質不穩定性或蛋白酶活性是一個問題,這可能對下游的成功很重要。

我們的 BirA 酶是大腸桿菌野生型,由 birA 基因編碼,并通過傳統方法純化至 99% 以上的純度。這種酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰輔酶A-羧化酶]連接酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;生物素:脫羧酶連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。

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